平菇又称千层蘑，侧耳，由于种植技术相对简单，种植的农户较多，平菇的菌种制作一般分为两种，一种为试管菌，一种为二级菌。
试管菌，也被称为一级菌种，他的种源有两种，一种是利用菌菇的组织进行培养，成功分离出菌种后扩繁。另一种为直接购买菌种试管进行扩繁。但不管是哪种，试管里培养基的配比是一样的，也就是我们常用的pda培养基，它的组成部分有马铃薯200克，葡萄糖20克，琼脂15～20克和水1000毫升，其中琼脂起凝固作用，根据制作时的气温调解用量。制作时先把马铃薯去皮，切成薄片或丝，用1000ml水煮沸10至15分钟，用多层纱布过滤出汁液，由于在分离马铃薯汁液过程中会损失一部分水分，可再加水保证1000ml，取琼脂 16克左右剪碎，现在的琼脂多为袋装片状，如果不经先期剪碎融化比较慢。把剪碎的琼脂放入1000ml马铃薯汁液中继续慢火熬制，待全部融化后加入20克葡萄糖，充分搅拌融化，用细纱布再过滤一次，晾至30～40度即可使用，试管儿要提前刷好备用，将pda陪养液灌至试管1/3处，用棉棒封口，以15至20个为一捆，封口处用牛皮纸包裹，以免棉棒吸入过多的水分，
放入高压锅中高温灭菌40分钟左右，取出斜放45°角，斜放时注意不可让营养液接触到封口棉棒，经冷却后即可使用，在无菌操作情况下接入平菇组织进行培养或接入购买的菌种进行培养扩繁，经七到十天菌丝即可长满试管，这时我们就可以接种二级菌，菌料的配比，各地不同，现将本地使用的一种配比方法，简单介绍一下。阔叶锯末75%，麸皮18%豆粕3%，石膏2%，生石灰2%，ph值调至7至7.5，经高压灭菌1.5小时或常规蒸汽灭菌12小时左右。晾至30°左右时，即可在无菌情况下接种一级试管菌，
在室温25至30°培养30至45天即可长满菌袋，可继续扩繁三级菌，也就是我们日常出菇的菌袋，不管哪个环节重中之重，就是要保证无菌操作，这也是菌种制作最关键的一点。
平菇菌种分母种、原种、栽培种。
母种可自己组织分离或从正规单位购买，组织分离一定要做岀菇试验，勿凭侥兴。配方：马铃薯（去皮）200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000亳升。马铃薯切丁煮沸，丁块酥而不烂为宜，用4层纱布过滤，取汁液，加入配方中成分，补足水1000毫升，加热至全部溶解后，分装试管，装量为试管1/4，用硅胶塞封口，捆扎好，管口盖上丙烯膜防水，竖直放高压锅消毒，锅内压力达0.5公斤压力时放冷气至压力为0，锅压达1公斤时，维持30分钟，勿增大压力和廷长时间，营养液不易凝固，取岀试管摆斜面，用棉被盖住，减少冷凝水。接种在无菌条件下进行，每支母种扩接40支左右。
原种配方：棉皮89％、麸皮10％、石灰1％。制作方法：原料加水拌匀，含水量60％左右，装瓶，盖上防水无棉盖体，进行消毒。1.5公斤压力下保持2小时，在菌箱或离子风下进行接种，每支母种接5瓶。接种后25度避光发菌。
栽培种制作，配方：玉米芯88％、麸皮10％、石灰2％。原料加水拌匀，闷堆24小时，水分适中，装袋，常压灭菌，当料温达100度时维持15小时，停火闷12小时，然后出锅接种，原种接栽培种在菌箱或无菌室的接种机下进行。
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